تطبيق الترشيح الفائق في عملية إنتاج لقاح DTP

تطبيقUالترشيح الفائق فيPإنتاجPعمليةالنشر المكتبي Vلقاح

 

1. لقاح DTP

السعال الديكي، المعروف باسم السعال الديكي، هو مرض معدٍ يصيب الجهاز التنفسي الحاد تسببه البورديتيلة السعال الديكي، ويؤثر في المقام الأول على الرضع والأطفال الصغار. وينتقل عن طريق الرذاذ التنفسي وله فترة حضانة من 7 إلى 10 أيام. سوف تظهر على المريض أعراض تراكم البلغم، بما في ذلك السعال. الخناق هو عدوى حادة في الجهاز التنفسي تسببها بكتيريا الوتدية الخناقية. تغزو البكتيريا الغشاء المخاطي للأنف أو الحلق، وتتكاثر وتنتج سمومًا خارجية وتسبب التهابًا موضعيًا ونخر الأنسجة. يدخل الكزاز، الناجم عن المطثية الكزازية، إلى جسم الإنسان عن طريق جروح الجلد أو الأغشية المخاطية. إنه يزدهر في الظروف اللاهوائية وينتج السموم، مما يؤدي إلى تقلصات العضلات التشنجية.

لقاح DTP هو لقاح مركب يحتوي على مكونات فعالة من البورديتيلة السعال الديكي، وسم الخناق، وسم الكزاز ممزوجة بنسب معينة وممتصة على مادة مساعدة من هيدروكسيد الألومنيوم. يتم استخدامه للوقاية من ثلاثة أمراض: السعال الديكي والدفتيريا والكزاز.

 

2. عملية إنتاج لقاح DTP

عادةً ما يكون لقاح DTP لقاحًا معطلًا. يتبع إعداد لقاح DTP عملية إنتاج اللقاح المعطل، وذلك لأسباب تتعلق بالسلامة في المقام الأول. حاليًا، تعتمد عملية إنتاج لقاحات DTP في الصين إلى حد كبير على التكنولوجيا في السبعينيات والثمانينيات من القرن الماضي. ومع ذلك، طوال العملية، تضمنت خطوات غسيل الكلى عددًا كبيرًا جدًا من مراحل الترشيح التقليدية، مما أثر بشكل كبير على عملية الإنتاج الإجمالية للمنتج. توفر منتجات الترشيح بغشاء التدفق العرضي ذات القنوات المفتوحة مزايا في فصل المنتجات البيولوجية في اتجاه مجرى النهر، مثل قوى القص المنخفضة ومعدلات الاسترداد العالية. وهي مناسبة بشكل خاص لفصل العينات ذات التركيزات العالية واللزوجة العالية والمحتوى العالي من الجسيمات، مما يجعلها مناسبة لعملية إنتاج لقاحات DTP.

3. تطبيق تكنولوجيا الترشيح الفائق للألياف المجوفة في عملية تنقية سائل مستضد اللقاح المشترك DTP الخالي من الخلايا

(1) المواد والأساليب

①عينة

محلول مستضد DTP الخالي من الخلايا الملوث والمكرر (يشار إليه فيما بعد بمحلول مستضد مطهر).

②الكواشف والأدوات الرئيسية

ماء بدرجة الحقن؛ كلوريد الصوديوم (الصف الصيدلاني)؛ كيس غسيل الكلى. 10 كيلو دالتون من الألياف المجوفة؛ مضخة تمعجية.

③الترشيح الفائق وتنقية سائل مستضد DTP الخالي من الخلايا

أولاً، قم بتركيز محلول المستضد المطهر إلى حوالي 5- أضعاف الحجم الأولي باستخدام ألياف مجوفة بقوة 10 كيلو دالتون. بعد ذلك، تبدأ عملية الترشيح والغسيل. بعد ذلك، قم بإيقاف الترشيح عندما يصل حجم الترشيح إلى حوالي 4 إلى 5 أضعاف الحجم الأولي. أخيرًا، اشطف النظام بأكمله واستعيد المرشح باستخدام 1- أضعاف حجم المحلول الملحي الفسيولوجي.

④غسيل الكلى وتنقية سائل مستضد DTP الخالي من الخلايا

قم بتعبئة محلول المستضد المطهر في أكياس غسيل الكلى بطريقة معقمة واغمره في محلول كلوريد الصوديوم المعقم بنسبة 0.85% ثم قم بإجراء غسيل الكلى عند درجة 2-8 .

⑤تحديد السائل المنقى

استعادة الترشيح الفائق وعينات السائل المستردة بغسيل الكلى إلى حجم ما قبل التنقية بشكل متناسب. استخدام محلول مستضد مطهر كعنصر تحكم وتحليل نقاء العينات باستخدام 12% SDS-PAGE. قم بقياس المحتوى الصلب في المحاليل وحساب معدل الاسترداد بعد الطرد المركزي للعينات عند 10،000 دورة في الدقيقة لمدة 15 دقيقة.

نتائج

①تركيز وغسل الترشيح الفائق للألياف المجوفة

أثناء عملية التركيز بالترشيح الفائق، يتم الحصول على 4800 مل من المرشح خلال 70 دقيقة، مما يؤدي إلى تركيز 5- أضعاف. ينخفض ​​معدل الترشيح بشكل مطرد، حيث يبلغ متوسط ​​معدل الترشيح 42 LMH (69.6 مل/دقيقة). أثناء عملية الغسيل، يتم الحصول على 5300 مل من المرشح خلال 90 دقيقة، مما يؤدي إلى غسل 4.4-أضعاف، وانخفاض معدل الترشيح بشكل مطرد، مع متوسط ​​معدل ترشيح يبلغ 36 LMH (59.5 مل / دقيقة). وأخيرا، شطف النظام بأكمله مع 1200 مل من المياه المالحة الفسيولوجية، وخلط محلول الشطف مع محلول الغسيل السابق (1200 مل). عامل التركيز النهائي للسائل هو 2.5-fold. بالمقارنة مع الترشيح الفائق، يتطلب غسيل الكلى تغيير الديالة خمس مرات ويستغرق حوالي 6 أيام.

②تحديد السائل المنقى

كشف تحليل SDS-PAGE أن نقاء سائل مستضد لقاح DTP الخالي من الخلايا والذي تم تنقيته بواسطة طريقتي الترشيح الفائق وغسيل الكلى يظل دون تغيير نسبيًا، كما هو موضح في الشكل أدناه. معدل الاسترداد لتنقية الترشيح الفائق أقل قليلاً من تنقية غسيل الكلى، كما هو موضح في الجدول أدناه.

عينة	المحتوى الصلب (٪)	معدل الاسترداد(٪)
محلول المستضد المطهر	0.872	/
السائل المستعاد بالترشيح الفائق (مخفض)	0.803	92.1
سائل غسيل الكلى المستعاد (مخفض)	0.813	93.2

 

خاتمة

الترشيح الفائق للألياف المجوفة عبارة عن تقنية فصل غشائي تستخدم على نطاق واسع في صناعات مثل الأغذية والتخمير والأدوية وحماية البيئة والهندسة الكيميائية لفصل المواد الجزيئية الكبيرة وتركيزها وتنقيتها. في هذه التجربة، تم استخدام تقنية الترشيح الفائق للألياف المجوفة لتنقية محلول مستضد DTP الخالي من الخلايا. تمت مقارنة المجرب مع غسيل الكلى التقليدي من حيث كفاءة التنقية ونسبة الشفاء. أظهرت النتائج أن الترشيح الفائق كان له كفاءة أعلى في إزالة عوامل إزالة السموم والأصباغ (يمكن تحقيقه خلال 3 ساعات، مقارنة بـ 5-7 يوم لغسيل الكلى) وكان معدل التعافي أعلى. تشير هذه إلى أن تطبيق الألياف المجوفة لتنقية الترشيح الفائق لسائل مستضد لقاح DTP الخالي من الخلايا أمر ممكن. يمكن أن يحل محل عمليات غسيل الكلى الحالية.