CM الأيونات الضعيفة-تحليل كروماتوغرافي بغشاء التبادل

SP كروماتوغرافيا غشاء التبادل الكاتيوني القوي مقدمة عن المنتج 

 

2. مزايا المنتج

سريعة وفعالة يمكن تحقيق قدرة ربط عالية بمعدلات تدفق تصل إلى 40 مرة أسرع من كروماتوغرافيا الراتينج التقليدية. مقارنةً بالكروماتوغرافيا التقليدية المعتمدة على الراتينج-، يمكن تقليل وقت العملية باستخدام الكروماتوغرافيا الغشائية بنسبة 30-40 مرة. معدل تدفق التشغيل النموذجي هو حوالي 10 MV/min.

2.2 كفاءة الربط العالية يعرض كروماتوغرافيا الغشاء قدرة ربط عالية ومعدلات تدفق عالية عند انخفاض الضغط المنخفض، مما يتيح التقاط الجزيئات الحيوية المشحونة في مسار واحد عبر الوحدة.

2.3 قابلة للتطوير ومرنة يمكن أن تلبي المجموعة الكاملة من منتجات الفصل الكروماتوغرافي الغشائي الاحتياجات المتنوعة لتنقية الجزيئات الحيوية، وتغطي التطبيقات بدءًا من تطوير العمليات وحتى الإنتاج على نطاق واسع-. يسمح تصميم الكبسولة بالتشغيل مرة واحدة-أو يمكن تنظيفه وإعادة استخدامه بعد إجراءات التنظيف المناسبة.

2.4 تحسين الإنتاجية يعمل التصميم المدمج على تقليل أثر المنشأة. من خلال التخلص من عمليات مثل تعبئة الأعمدة، والتنظيف، والتحقق من التنظيف، وتخزين الأعمدة، يمكن أن تبدأ المعالجة بعد موازنة بسيطة مع مخزن مؤقت أقل نسبيًا. نظرًا لعدم الحاجة إلى تعبئة الأعمدة، أو التنظيف، أو التخزين، فيمكن تقليل تكاليف العمالة بأكثر من 50%.

 

 

3 المعلمات التقنية

3.1 المواد الإنشائية

	مقياس المختبر	نطاق صغير	مقياس تجريبي	حجم الإنتاج
حجم الغشاء	0.2 مل	5 مل	140 مل	5L
هيكل دعم الغشاء	مادة البولي بروبيلين
السكن الغشاء	مادة البولي بروبيلين
يا خاتم	سيليكون

3.2 خصائص التشغيل

	مقياس المختبر	نطاق صغير	مقياس تجريبي	حجم الإنتاج
حجم الغشاء	0.2 مل	5 مل	400 مل	5L
معدل التدفق الموصى به	1-6 مل/دقيقة	25-150 مل/دقيقة	2-12 لتر/دقيقة	25-150 لتر/دقيقة
درجة حرارة التشغيل القصوى	35 درجة
الحد الأقصى لضغط التشغيل	3 بار (25 درجة)
أقصى فرق الضغط	3 بار (25 درجة)
شروط التخزين	20% eثانولaهادئsoltion

تظهر المقارنة أن عمر خدمة كروماتوغرافيا الغشاء SP يمكن مقارنته بعمر خدمة SP Sepharose 6FF.

الشكل 1. تغييرات قدرة الربط لكروماتوغرافيا غشاء SP بعد استخدامات متعددة تم اختبارها باستخدام الليزوزيم

وبالإضافة إلى ذلك، قمنا بتقييم كروماتوغرافيا الغشاء لكفاءته في إزالة بروتينات الخلية المضيفة والأحماض النووية. النتائج هي كما يلي:

	الحمض النووي				HCP
	استعادة IgG	المحتوى (pg/mg من IgG) بواسطة RT PCR		عامل الإزالة	المحتوى (نانوغرام / ملغ من IgG) بواسطة إليسا		عامل الإزالة
يجري	%	قبل غشاء Q	بعد غشاء Q	سجل	قبل غشاء Q	بعد غشاء Q	سجل
1	96.4	423	3.6	2.07	7	4.3	0.21
2	97.4	438	4.3	2.01	7	4.7	0.17
3	94.1	513	5.8	1.95	6	2.3	0.42
4	96.2	32	0.8	1.60	6	3.2	0.27
5	96.3	45	1.9	1.37	8	3.4	0.37
6	96.7	158	2.4	1.82	8	3.5	0.36
7	96.4	267	2.6	2.01	9	6	0.18
8	96.8	298	3.6	1.92	9	7	0.11
9	97.9	746	9.8	1.88	4	1.5	0.43
10	96.2	39	3.2	1.09	4	1.4	0.46

الجدول 1. معدلات إزالة الحمض النووي وبروتين الخلية المضيفة في مادة CHO - المعبر عنها باستخدام IgG باستخدام التحليل اللوني للغشاء SP

أظهرت سلسلة من التجارب أن كروماتوغرافيا غشاء SP يمكنها إزالة الملوثات بشكل فعال مع الحفاظ على معدل استرداد مرتفع لـ IgG المستهدف.

عند مقارنة كروماتوغرافيا غشاء Gudiling SP مع العلامات التجارية المستوردة، تكون بيانات سعة الربط كما يلي:

ملزمcالقدرة (ملغ / مل)	سارتوريوس	بال	توجيه
الليزوزيم	25	32	29
التربسين	22	27	25

الجدول 2. أداء القدرة الملزمة للبروتينات المختلفة في منتجاتنا والعلامات التجارية المنافسة

يظهر التقييم الشامل أن قدرتنا الملزمة مماثلة لتلك الخاصة بالمنتجات المستوردة.

الشكل 2. اختبار القدرة الملزمة لوحدة الفصل اللوني للغشاء SP باستخدام الليزوزيم كمعيار

بالمقارنة مع قدرة الارتباط الديناميكي والمنتجات المستوردة، تم التأكيد على أنه يمكن التقاط معظم البروتينات المستهدفة عندما يتم التخلص من الليزوزيم في 190 ملي مول كلوريد الصوديوم.

من خلال ظروف شطف مختلفة، وجدنا أن ملامح شطف كروماتوغرافيا الغشاء تشبه تلك الموجودة في هلام الاغاروز، ولكن نقاء البروتينات يختلف بشكل كبير في تركيزات الملح المختلفة. في البحث والتطوير والإنتاج الفعلي، من الضروري تحديد ظروف الشطف المثالية كميًا للحصول على -بروتينات مستهدفة عالية النقاء.

 

4 حالات التطبيق النموذجية

إزالة الحمض النووي والفيروسات وبروتينات الخلية المضيفة

التقاط البلازميدات والفيروسات والبروتينات وتنقية أليغنوكليوتيدات

إزالة الأصباغ من مرق تخمير الخميرة والحصول على -بروتين عالي القدرة

 

5 إجراءات الاستخدام

5.1 إعداد وتجميع المعدات:

5.1.1: قم بتثبيت وحدة كروماتوغرافيا الغشاء على نظام كروماتوغرافيا ÄKTA باتباع إجراءات مشابهة لأعمدة الراتنج، مع ضمان محاذاة اتجاه التدفق مع أسهم الوحدة واتجاه المدخل. قم بتوصيل الوحدة باستخدام أقفال Luer أو تجهيزات نمط المشبك-للتكامل الآمن في النظام.

5.1.2 اضبط معدل تدفق التغذية على5-10 فولت/دقيقةوإزالة الغاز من الوحدة باستخدام المخزن المؤقت للموازنة، مما يضمن أن النفايات السائلة خالية من فقاعات الهواء. بمجرد تفريغه من الغاز، قم بتوصيل منفذ التخلل بالنظام اللوني.

5.2:معالجة ما قبل-الاستخدام:

5.2.1:

اضبط معدل تدفق التغذية على5-10 فولت/دقيقةوإجراء العلاج-السابق باستخدام0.5 M NaOH لأكثر من 5 MV، مما يضمن وصول الغشاء إلى التوازن الكامل.

5.2.2: بنفس معدل التدفق، قم بإجراء المعالجة المسبقة- باستخدام1 M NaCl لأكثر من 5 MVلضمان وصول الغشاء إلى التوازن الكامل.

5.3 عملية الفصل اللوني

5.3.1 اضبط معدل تدفق التغذية على 5-10 ميجا فولت/دقيقة وقم بموازنة الغشاء باستخدام مخزن مؤقت للموازنة لأكثر من 5 ميجا فولت، حتى يصل الغشاء إلى التوازن الكامل.

5.3.2 بعد الترشيح المسبق بمقدار 0.22 ميكرومتر، قم بتحميل العينة على الغشاء حتى يكتمل تحميل العينة أو يتم الوصول إلى قدرة الارتباط الكروماتوغرافي.

5.3.3 يغسل بمخزن مؤقت للموازنة لأكثر من 10 ميجا فولت حتى تعود إشارة الأشعة فوق البنفسجية إلى خط الأساس.

5.3.4 تطبيق الشطف المتدرج أو الشطف التدريجي وفقا لتصميم العملية، وجمع الكسور كما هو مطلوب.

5.4 عملية التنظيف المكاني (CIP)-معالجة الاستخدام - جهاز الفصل الكروماتوغرافي الغشائي CIP (التنظيف في المكان)

5.4.1 اضبط معدل تدفق التغذية على 5-10 ميجا فولت/دقيقة وقم بإجراء التنظيف باستخدام 1 مولار هيدروكسيد الصوديوم لأكثر من 10 ميجا فولت، حتى تنخفض إشارة الأشعة فوق البنفسجية إلى ما دون خط الأساس.

5.4.2 بعد التدوير لمدة 30 دقيقة، انتقل إلى الغسيل المائي حتى يصل الرقم الهيدروجيني إلى 7-8، ثم استمر في التنظيف باستخدام 20% إيثانول حتى تصبح الموصلية ثابتة تقريبًا.

5.5 تخزين اللوني الغشائي

بعد الاستخدام واستكمال التنظيف المكاني (CIP)، يمكن إزالة وحدة الغشاء وتخزينها عن طريق نقعها في 20% من الإيثانول، أو يمكن تخزينها في خط -في درجة حرارة الغرفة في محلول يحتوي على 20% من الإيثانول. يجب فحص محلول الإيثانول بنسبة 20٪ واستبداله بشكل دوري.

 

6. طلب ​​المعلومات

Q مرشح كبسولة كروماتوغرافيا غشاء التبادل الأنيوني القوي

	مقياس المختبر	نطاق صغير	مقياس تجريبي	حجم الإنتاج
نموذج المنتج	IEXQ0002ES	IEXQ0050ES	IEXQ0400ES	IEXQ5000ES
حجم الغشاء	0.2 مل	5 مل	400 مل	5L

الوسم : cm الأيونات الضعيفة-كروماتوغرافيا غشاء التبادل، الصين، الموردين، الشركات المصنعة، المصنع، البيع بالجملة، بالجملة، في المخزون، عينة مجانية