Q كروماتوغرافيا غشاء أنيون قوي
1. نظرة عامة كروماتوغرافيا التبادل الأيوني هي تقنية تنقية تفصل الجزيئات الحيوية بناءً على الاختلافات في خصائص الشحنة وكمية الشحنة. وبما أن معظم الجزيئات البيولوجية الكبيرة تحتوي على مجموعات الكربوكسيل أو الهيدروكسيل، فيمكن تعديل خصائص شحنتها وحجمها...
مقدمة المنتج

1. نظرة عامة
كروماتوغرافيا التبادل الأيوني هي تقنية تنقية تفصل الجزيئات الحيوية بناءً على الاختلافات في خصائص الشحنة وكمية الشحنة. وبما أن معظم الجزيئات البيولوجية الكبيرة تحتوي على مجموعات الكربوكسيل أو الهيدروكسيل، فيمكن تعديل خصائص شحنتها وحجمها من خلال التحكم في قيمة الرقم الهيدروجيني للمحلول المنظم. بعد أن ترتبط الجزيئات الحيوية بوسط تبادل أنيوني أو كاتيوني مشحون بشكل معاكس، يتم تحقيق الانفصال عن طريق تغيير القوة الأيونية أو الرقم الهيدروجيني للطور المتحرك، مما يتسبب في شطف الجزيئات ضعيفة الارتباط أولاً، تليها الجزيئات المرتبطة بقوة.
2. مزايا المنتج
2.1 سريع وفعال - يحقق قدرة ربط عالية بمعدلات تدفق تصل إلى 40 مرة أسرع من الراتنجات التقليدية. بالمقارنة مع كروماتوغرافيا الطبقة المعبأة-، يتم تقليل وقت العملية باستخدام كروماتوغرافيا الأغشية بنسبة 30-40 مرة. معدل تدفق التشغيل النموذجي هو 10 MV/min.
2.2 كفاءة الارتباط العالية - تُظهر كروماتوغرافيا الغشاء قدرة تحميل عالية ومعدلات تدفق عالية في ظل ظروف انخفاض الضغط المنخفض، مما يسمح بالتقاط الجزيئات الحيوية المشحونة في مسار واحد.
2.3 قابلة للتطوير ومرنة - يمكن للسلسلة الكاملة من منتجات التحليل الكروماتوغرافي الغشائي أن تلبي الاحتياجات المتنوعة لتنقية الجزيئات الحيوية، وتغطي جميع المراحل بدءًا من تطوير العملية وحتى الإنتاج على نطاق واسع-. يدعم التصميم الهيكلي من النوع-الكبسولة عملية الاستخدام الفردي- وإعادة الاستخدام بعد التنظيف.
2.4 تحسين الإنتاجية - يعمل التصميم المدمج على تقليل أثر المنشأة. من خلال التخلص من تعبئة الأعمدة، والتنظيف، والتحقق من صحة التنظيف، وعمليات تخزين الأعمدة، تتطلب العملية مخزنًا مؤقتًا أقل للموازنة ويمكن تنفيذها مباشرة دون إعداد العمود. ويمكن خفض تكاليف العمالة بنسبة تصل إلى 50٪.
3. المعلمة الفنية
3.1 المواد الإنشائية
|
مقياس المختبر |
نطاق صغير |
مقياس تجريبي |
حجم الإنتاج |
|
|
حجم الغشاء |
0.2 مل |
5 مل |
140 مل |
5L |
|
هيكل دعم الغشاء: |
مادة البولي بروبيلين (PP) |
|||
|
السكن الغشاء |
مادة البولي بروبيلين (PP) |
|||
|
يا خاتم |
سيليكون |
|||
3.2 خصائص التشغيل
|
مقياس المختبر |
نطاق صغير |
مقياس تجريبي |
حجم الإنتاج |
|
|
حجم الغشاء |
0.2 مل |
5 مل |
400 مل |
5L |
|
معدل التدفق الموصى به |
1-6 مل/دقيقة |
25-150 مل/دقيقة |
2-12 لتر/دقيقة |
25-150 لتر/دقيقة |
|
درجة حرارة التشغيل القصوى |
35 درجة |
|||
|
الحد الأقصى لضغط التشغيل |
3 بار (25 درجة) |
|||
|
أقصى فرق الضغط |
3 بار (25 درجة) |
|||
|
شروط التخزين: |
20٪ محلول مائي من الإيثانول |
|||
عمر الخدمة للكروماتوغرافيا الغشائية Q يشبه عمر كروماتوجرافيا الاغاروز.



الشكل 1. التغييرات في قدرة التحميل اللوني للغشاء بعد الاستخدامات المتعددة التي يراقبها BSA
بالإضافة إلى ذلك، قمنا بتقييم كفاءة إزالة اللوني للغشاء لبروتينات الخلية المضيفة والأحماض النووية. النتائج هي كما يلي.
|
|
الحمض النووي |
HCP |
|||||
|
|
استعادة IgG |
عامل الإزالة |
المحتوى (نانوغرام / ملغ من IgG) بواسطة إليسا |
عامل الإزالة |
|||
|
يجري |
% |
قبل غشاء Q |
بعد غشاء Q |
سجل |
قبل غشاء Q |
بعد غشاء Q |
سجل |
|
1 |
96.7 |
423 |
1.2 |
2.55 |
7 |
4.8 |
0.16 |
|
2 |
97.4 |
438 |
1.3 |
2.53 |
7 |
4.9 |
0.15 |
|
3 |
94.7 |
513 |
1.3 |
2.60 |
6 |
1.9 |
0.50 |
|
4 |
95 |
32 |
0.9 |
1.55 |
6 |
4.2 |
0.15 |
|
5 |
96.3 |
45 |
1.1 |
1.61 |
8 |
5.2 |
0.19 |
|
6 |
96.5 |
158 |
0.7 |
2.35 |
8 |
6.2 |
0.11 |
|
7 |
96.4 |
267 |
1.9 |
2.15 |
9 |
7.2 |
0.10 |
|
8 |
96.8 |
298 |
2.3 |
2.11 |
9 |
8.2 |
0.04 |
|
9 |
97.1 |
746 |
1.5 |
2.70 |
4 |
2 |
0.30 |
|
10 |
96.6 |
39 |
1 |
1.59 |
4 |
1.5 |
0.43 |
الجدول 1. معدلات إزالة الحمض النووي وبروتينات الخلية المضيفة في مادة IgG المعبر عنها بـ CHO- باستخدام كروماتوغرافيا غشاء Q
أظهرت سلسلة من التجارب أن كروماتوغرافيا غشاء Q يمكنها إزالة الشوائب بشكل فعال مع الحفاظ على استعادة IgG عالية الهدف.
بالإضافة إلى ذلك، قمنا بمقارنة كروماتوغرافيا غشاء Gudiling مع العلامات التجارية المستوردة، وكانت بيانات سعة التحميل كما يلي:
|
قدرة التحميل (ملجم / مل) |
سارتوريوس |
بال |
توجيه |
|
جيش صرب البوسنة |
29 |
60 |
45 |
|
الاحمق |
25 |
40 |
35 |
|
بروتين أ |
27 |
45 |
40 |
|
التربسين |
30 |
56 |
44 |
الجدول 2. تحميل أداء البروتينات المختلفة على منتجاتنا والمنتجات المنافسة
يظهر التقييم العام أن قدرة التحميل لدينا قابلة للمقارنة مع المنتجات المستوردة،

الشكل 2.باستخدام وحدة كروماتوغرافيا الغشاء Q، تم استخدام BSA كبروتين قياسي لتقييم قدرة الارتباط. وتمت مقارنة قدرة الربط الديناميكي مع قدرة المنتجات المستوردة. أظهرت النتائج أنه يمكن التقاط معظم البروتين المستهدف واستخلاصه150 ملي مول كلوريد الصوديومعند استخدام BSA كبروتين نموذجي.
من خلال ظروف الشطف المختلفة، وجدنا أن سلوك الشطف للكروماتوغرافيا الغشائية يشبه سلوك كروماتوجرافيا الاغاروز. نقاء البروتينات مزال في تركيزات مختلفة من الملح يختلف بشكل كبير. في تطوير العملية الفعلية والإنتاج، من الضروري تحديد ظروف الشطف المثلى كميًا من أجل الحصول على البروتين المستهدف بدرجة نقاء عالية.
4.حالة التطبيق النموذجية
إزالة الحمض النووي والفيروسات وبروتينات الخلية المضيفة (HCP) والسموم الداخلية
التقاط البلازميدات والفيروسات والبروتينات، وكذلك تنقية أليغنوكليوتيدات
5. إجراءات التشغيل
5.1: إعداد المعدات وتجميعها:
5.1.1: نظام اللوني AKTA: قم بتثبيت وحدة اللوني الغشائي بطريقة مشابهة للأعمدة المعبأة. تأكد من أن اتجاه السهم الموجود على الوحدة يتوافق مع اتجاه تدفق التغذية. قم بتوصيل النظام باستخدام موصلات Luer أو تركيبات Tri-Clamp.
5.1.2 اضبط معدل تدفق المدخل على 5-10 ميجا فولت/دقيقة واستخدم المخزن المؤقت للموازنة لإزالة الهواء من النظام. بعد التأكد من عدم وجود فقاعات هواء في تيار المخرج، قم بتوصيل منفذ التخلل بالنظام اللوني.
5.2:معالجة ما قبل-الاستخدام:
5.2.1:
Set the inlet flow rate to 5–10 MV/min and perform pre-treatment with 0.5 M NaOH at >5 MV لضمان وصول الغشاء إلى التوازن.
5.2.2:
At the same flow rate, perform pre-treatment with 1 M NaCl at >5 MV لضمان وصول الغشاء إلى التوازن.
5.3 عملية الفصل اللوني
5.3.1 Set the feed flow rate to 5–10 MV/min and perform pre-treatment with equilibration buffer at >5 MV حتى يصل الغشاء إلى التوازن.
5.3.2 بعد ترشيح العينة مسبقًا-من خلال مرشح 0.22 ميكرومتر، قم بتحميلها على العمود حتى يتم تطبيق العينة بأكملها أو الوصول إلى سعة الربط الكروماتوغرافي.
5.3.3 Flush with equilibration buffer at >10 MV حتى تنخفض إشارة الأشعة فوق البنفسجية إلى خط الأساس.
5.3.4 إجراء شطف متدرج أو خطي وفقًا للبروتوكول المصمم، وجمع الكسور حسب الحاجة.
5.4 معالجة ما بعد الاستخدام للتنظيف المكاني (CIP) - جهاز الفصل الكروماتوغرافي الغشائي CIP
5.4.1 Set the feed flow rate to 5–10 MV/min and treat with 1 M NaOH at >10 MV حتى تنخفض إشارة الأشعة فوق البنفسجية تحت خط الأساس.
5.4.2 بعد التدوير لمدة 30 دقيقة، قم بالتبديل إلى الغسيل المائي حتى يصل الرقم الهيدروجيني إلى 7-8، ثم قم بالتبديل إلى 20% إيثانول واستمر في الغسيل حتى تستقر الموصلية.
5.5، تخزين اللوني الغشائي:
بعد الاستخدام واستكمال التنظيف المكاني (CIP)، يمكن تفكيك وحدة الغشاء وتخزينها في 20% من الإيثانول، أو الاحتفاظ بها على الإنترنت في درجة حرارة الغرفة في 20% من الإيثانول. يجب استبدال محلول الإيثانول وفحصه بشكل دوري.
6. طلب المعلومات
Q أنيون قوي-مرشح كبسولة كروماتوغرافيا الغشاء التبادلي
|
مقياس المختبر |
نطاق صغير |
مقياس تجريبي |
حجم الإنتاج |
|
|
نموذج المنتج |
IEXQ0002ES |
IEXQ0050ES |
IEXQ0400ES |
IEXQ5000ES |
|
حجم الغشاء |
0.2 مل |
5 مل |
400 مل |
5L |
الوسم : q كروماتوغرافيا غشاء أنيون قوي، الصين، الموردين، الشركات المصنعة، مصنع، بالجملة، بالجملة، في المخزون، عينة مجانية
قد يعجبك ايضا
إرسال التحقيق












